所属单位：农业部禽用生物制品创制重点实验室;农业部畜禽传染病学重点开放实验室;江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心;扬州大学农业科技发展研究院;扬州大学兽医学院;江苏省研究生工作站;
发表刊物：中国预防兽医学报
关键字：猪圆环病毒3型;;Cap蛋白;;单克隆抗体;;免疫组化
摘要：为制备猪圆环病毒3型(PCV3)Cap蛋白单克隆抗体(MAb),并初步应用于感染细胞或组织样品中PCV3抗原的间接免疫荧光试验(IFA)或免疫组化(IHC)检测,本研究将PCV3 Cap蛋白的去核定位信号肽基因克隆于原核表达载体pET-28a中,经IPTG诱导表达了具有免疫原性的融合蛋白。以表达的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,共获得8株能够稳定分泌针对PCV3 Cap蛋白的MAb杂交瘤细胞株。Western blot与IFA试验结果显示,8株MAbs均能够与真核表达的重组Cap蛋白反应。选取3株杂交瘤细胞制备3株MAbs,小鼠腹水效价分别为1∶409 600、1∶204 800和1∶409 600。利用3株MAbs对自然感染PCV3临床病猪的腹股沟淋巴结进行IHC检测,结果显示3株MAbs的腹水均能够与感染PCV3的临床样品发生特异性的免疫反应。本研究制备的MAbs具有较好的特异性,为深入研究Cap蛋白的结构和PCV3快速诊断奠定了基础。
第一作者：赵冬
论文编号：20210428010
卷号：41
期号：02
页面范围：174-178
是否译文：否
发表时间：2019-01-01